中性粒细胞外陷阱（NETs）杀灭金黄色葡萄球菌及糖皮质激素对其影响的体外研究

【摘要】目的：评估中性粒细胞胞外陷阱(NETs)对金黄色葡萄球菌的体外杀灭作用,并探讨糖皮质激素对NETs形成和杀菌效率的影响。方法：从健康志愿者外周血中分离出中性粒细胞,加入一定浓度的金黄色葡萄球菌,免疫荧光染色观察不同作用时间的NETs形成,利用IPP显微镜图像分析软件定量测定NETs形成率。通过细胞松弛素D抑制中性粒细胞的吞噬和脱颗粒,测定NETs的杀菌效率；以松弛素D预处理中性粒细胞后再用DNase破坏NETs结构,检测无NETs作用下细菌负荷量,测定NETs杀菌效率,分析NETs形成率和NETs杀菌率之间的相关性。在此基础上使用三种不同浓度的地塞米松(1,10,100μg/ml)处理中性粒细胞,加入金黄色葡萄球菌,以同样方法测定NETs形成和杀菌效率,分析地塞米松对NETs形成率和NETs杀菌率的影响。结果：体外中性粒细胞在金黄色葡萄球菌的刺激下形成NETs,中性粒细胞在抗感染过程中吞噬作用和NETs同时存在,NETs的形成率与两者作用时间呈正相关,杀菌率在2小时内呈正相关,DNase水解NETs后杀菌率明显下降。NETs的形成和杀菌率均受地塞米松的影响,中高浓度的地塞米松抑制了NETs的形成和杀菌率。结论：金黄色葡萄球菌能诱导中性粒细胞形成NETs,中性粒细胞在抗感染过程中吞噬作用和NETs同时存在,NETs具有优越的抗菌功能。NETs形成率和杀菌率在一定时间内呈正相关；糖皮质激素可能通过抑制NETs的形成从而抑制了中性粒细胞的抗感染作用。
【作者】金梅；
【导师】徐键；
【作者基本信息】浙江大学，妇产科学，2014，硕士
【关键词】NETs；地塞米松；中性粒细胞；金黄色葡萄球菌；

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